Полімеразна ланцюгова реакція зі зворотною транскрипцією

Полімеразна ланцюгова реакція зі зворотною транскрипцією або ЗТ-ПЛР (англ. reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR) — це лабораторний метод молекулярної біології, різновид ПЛР, що дає змогу використовувати як вихідний матеріал молекули РНК (найчастіше мРНК) для подальшої ампліфікації (збільшення кількості фрагментів) комплементарної ДНК (кДНК).

Основою методу є попередній синтез кДНК на матриці РНК за допомогою ферменту зворотної транскриптази (ревертази)^[1]. Оскільки кДНК не розкладається рибонуклеазами, вона стабільніша, ніж РНК. Синтезована кДНК потім ампліфікується іншим ферментом — ДНК-полімеразою^[2].

Формати проведення

ПЛР зі зворотною транскрипцією проводиться у двоетапному (двокроковому) або одноетапному форматах. У двоетапній ЗТ-ПЛР кожен етап виконується послідовно за власних оптимальних умов: спочатку здійснюється синтез кДНК у буфері для зворотної транскрипції, після чого одну десяту частину отриманої суміші відбирають для проведення ПЛР. В одноетапній ЗТ-ПЛР зворотна транскрипція та ампліфікація відбуваються послідовно в одній пробірці за умов, оптимізованих для обох реакцій^[3].

Практичне використання

Метод застосовують у різних галузях, таких як медична діагностика, судова медицина та молекулярне клонування^[4].

Примітки

↑ Афанасьєва, К. С.; Чопей, М. І. (2024). Сучасні методи молекулярної біології (PDF) (навчально-методичний посібник). К.: ННЦ «Інститут біології та медицини» КНУ імені Тараса Шевченка. с. 129.
↑ Definition of reverse transcription-polymerase chain reaction - NCI Dictionary of Cancer Terms (англ.). National Cancer Institute. Процитовано 9 серпня 2026.
↑ Santos, C.F.; Sakai, V.T.; Machado, M.A.; Schippers, D.N.; Greene, A.S. (2004). Reverse transcription and polymerase chain reaction: principles and applications in dentistry. Journal of Applied Oral Science. 12 (1): 1—11. doi:10.1590/S1678-77572004000100002.
↑ Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). Advanced Polymerase Chain Reaction Technologies for Cancer Diagnostics (англ.). Bentham Science Publishers. 2015. Процитовано 9 серпня 2026.

Посилання

Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR) Theory — сайт освітньої платформи Labster (англ.)

[Афанасьєва_Чопей_2024-1] Афанасьєва, К. С.; Чопей, М. І. (2024). Сучасні методи молекулярної біології (PDF) (навчально-методичний посібник). К.: ННЦ «Інститут біології та медицини» КНУ імені Тараса Шевченка. с. 129.

[NCI_RTPCR-2] Definition of reverse transcription-polymerase chain reaction - NCI Dictionary of Cancer Terms (англ.). National Cancer Institute. Процитовано 9 серпня 2026.

[Santos2004-3] Santos, C.F.; Sakai, V.T.; Machado, M.A.; Schippers, D.N.; Greene, A.S. (2004). Reverse transcription and polymerase chain reaction: principles and applications in dentistry. Journal of Applied Oral Science. 12 (1): 1—11. doi:10.1590/S1678-77572004000100002.

[Bentham_RTPCR_2015-4] Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). Advanced Polymerase Chain Reaction Technologies for Cancer Diagnostics (англ.). Bentham Science Publishers. 2015. Процитовано 9 серпня 2026.

[1]

[2]

[3]

[4]